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色譜峰寬的構(gòu)成

更新時(shí)間:2016-09-19      點(diǎn)擊次數(shù):2433

       色譜分析時(shí)經(jīng)常會(huì)有先出來(lái)的峰就窄,出來(lái)的就寬的情況。色譜峰寬是由很多因素構(gòu)成的,每個(gè)因素影響程度不同,造成的結(jié)果也不同,誰(shuí)的影響力大,就主要顯示誰(shuí)的作用結(jié)果。那么色譜峰寬,到底由哪幾部分構(gòu)成?

    色譜峰寬由兩部分構(gòu)成: 一、對(duì)稱峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對(duì)稱峰寬,就是指這種峰寬不會(huì)造成峰型不對(duì)稱,不會(huì)出現(xiàn)拖尾前伸。而拖尾峰寬,就是指這個(gè)峰寬構(gòu)成,會(huì)導(dǎo)致峰形狀變的不對(duì)稱。我們首先要研究的是對(duì)稱峰寬,這個(gè)導(dǎo)致了峰寬的主要構(gòu)成。

一、對(duì)稱峰寬。

對(duì)稱峰寬主要包括兩部分:1、塔板理論正常展寬。2、正常進(jìn)樣峰展寬。

1、塔板理論正常展寬

    根據(jù)塔板理論,進(jìn)樣時(shí)處于0號(hào)塔板的組分,離開色譜柱時(shí)已經(jīng)占據(jù)了很多塊塔板,導(dǎo)致峰寬加大,并形成正態(tài)分布的峰型。

2、正常的進(jìn)樣展寬

    根據(jù)塔板理論,樣品進(jìn)樣時(shí)都停留在0號(hào)塔板上,但這是不可能的。因?yàn)橐粋€(gè)塔板的體積是如此的小,以至于根本放不下襯管里面哪怕是經(jīng)過(guò)分流之后的樣品。比如你的襯管有0.5ml,分流比50倍,那么進(jìn)入色譜柱的體積大約有10立方毫米。但你的毛細(xì)管柱內(nèi)徑就算是0.53mm的,可是這是直徑啊,算下來(lái),這些樣品都進(jìn)去,也要占據(jù)大約50mm長(zhǎng)的柱子。也就是說(shuō),0號(hào)塔板放不下,要放到。。。。算你的柱子是50m,那么就是柱效的千分之一了,毛細(xì)管柱,算你10萬(wàn)塊板,那么也是100塊塔板了。

   那么說(shuō),進(jìn)樣寬度就是100塊塔板了?錯(cuò)。進(jìn)樣寬度沒(méi)有這么大,只有這個(gè)數(shù)值除以分配比k之后的塔板數(shù)。為什么要除以分配比?因?yàn)樯V柱固定相可以溶解很多樣品中待測(cè)組分,所以待測(cè)組分在這100塊板上濃度不同,只有前面1/k的塔板上濃度比較高。

1、為什么毛細(xì)管柱,所有色譜峰基本一般寬?

答:因?yàn)槊?xì)管柱內(nèi)徑小,樣品進(jìn)樣正常展寬很大,而且因?yàn)橹剩ɡ碚撍鍞?shù))高,所以塔板理論展寬與柱效率的平方根成反比,這個(gè)很小,所以峰寬主要由進(jìn)樣展寬構(gòu)成,而組分的進(jìn)樣展寬在色譜柱內(nèi)前進(jìn)時(shí)保持不變,所以從柱尾流出來(lái)的時(shí)候,寬度主要由進(jìn)樣展寬決定,而所有組分的進(jìn)樣展寬基本一致,因此都是一樣寬。

 2、為什么填充柱色譜,先出峰很窄,后出峰很寬?

答:因?yàn)樘畛渲膬?nèi)徑大,樣品進(jìn)樣正常展寬很小,所以峰寬主要是踏板理論展寬構(gòu)成,而根據(jù)踏板理論,峰寬與保留時(shí)間成正比,所以后出的峰比較寬。

3、為什么會(huì)有溶劑聚焦現(xiàn)象?

答:因?yàn)槿軇┚劢故侵涑跏紲囟缺热軇┓悬c(diǎn)低,導(dǎo)致溶劑在柱頭冷凝成液體,相當(dāng)于增加了一層溶解度很大的固定液,導(dǎo)致分配比k增加很多倍,這樣進(jìn)樣寬度就減小很多倍,所以色譜峰就窄了。

4、為什么有的難分離組分用薄膜柱子或者固定液涂澤量少的柱子來(lái)分析分離度大,而更多的組分用厚膜或者固定液涂澤量大的分離度高?

答:分離度等于保留時(shí)間之差除以峰寬之和的一半。根據(jù)速率理論,薄膜的柱子傳質(zhì)阻力小,所以柱效率高,分離度高。但根據(jù)進(jìn)樣寬度,厚膜柱子分配比k大,所以進(jìn)樣展寬小,色譜峰寬小,因此分離度高。

     一般來(lái)說(shuō),高含量組分用厚膜柱子好,可以減少進(jìn)樣寬度,增加分離度;低含量組分用厚膜柱子好,因?yàn)楹衲ぶ釉试S更大的進(jìn)樣量,檢出限高。?。磕敲幢∧ぶ泳蜎](méi)存在的必要了?錯(cuò)。薄膜柱子柱流失小的多,而且對(duì)于含量不大不小的樣品,也有更好的分離度。

 

 

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